Immunoexpressão das proteínas DEK e Fosfo-P38 no câncer retal antes da quimiorradioterapia / Immunoexpression of dek and phospho-p38 proteins in rectal cancer before chemoradiation therapy

ABSTRACT Background: Colorectal cancer is the third cause of cancer worldwide and a quarter of them are in the rectum. DEK oncogene is involved in several nuclear processes and can accelerate tumorigenesis. Objective: This study aims to evaluate the immunoexpression of DEK and Phospho-P38 proteins before neoadjuvant therapy in patients with rectum adenocarcinoma and correlate it with a clinical response and survival. Methods: Patients with adenocarcinoma of the middle and low rectum who underwent chemotherapy and radiotherapy followed by surgical tumor resection were included. The expression and quantification were studied by immunohistochemistry in the tumor biopsy tissues using a HScore system. Score ≥4 were considered positive and those with <4 negative. Results: 22 patients were included with a mean age of 63.55 years (SD: ±13.49). The clinical-stage before treatment was T3 on 72.7%, T4 on 18.2%, 31.8% were N1, 50% N0 and all M0. After chemo and radiotherapy, 54.6% were T3; 22.7% were classified as T2; 9.1% as T1, and 13.6% were T0. Among the tumors, 22.7% were positive for DEK and 63.6% positive for Phospho-P38. There was a positive correlation between DEK protein before treatment and pTNM stage (P=0.011). Phospho-P38 protein showed no correlation with these parameters. Patients with a negative HScore had a mean survival of 141.33 months (95%CI: 112.41-170.25) and those with a positive HSscore had a mean survival of 25.10 months (95%CI: 17.36-32.84; P<0.001). Conclusion: A higher expression of DEK was observed in advanced stages. Patients who presented DEK expression <4 had a higher survival, being a factor of worst prognosis.

RESUMO Contexto: O câncer colorretal é mundialmente, a terceira causa de câncer e um quarto destes estão localizados no reto. O oncogene DEK está envolvido em vários processos nucleares e pode acelerar a tumorigênese. Objetivo: Este estudo tem como objetivo avaliar a imunoexpressão das proteínas DEK e Fosfo-P38 antes da terapia neoadjuvante em pacientes com adenocarcinoma de reto e correlacioná-la com resposta clínica e sobrevida. Métodos: Foram incluídos pacientes com adenocarcinoma de reto médio e baixo submetidos à quimio e radioterapia seguida de ressecção cirúrgica do tumor. A expressão e quantificação foram estudadas por imuno-histoquímica nos tecidos de biópsia tumoral utilizando um sistema HScore. Escores ≥4 foram considerados positivos e aqueles com <4 negativos. Resultados: Foram incluídos 22 pacientes com média de idade de 63,55 anos (DP: ±13,49). O estágio clínico antes do tratamento era T3 em 72,7%, T4 em 18,2%, 31,8% eram N1, 50% N0 e todos M0. Após a quimio e radioterapia, 54,6% eram T3; 22,7% eram T2; 9,1% eram T1 e 13,6% T0. Entre os tumores, 22,7% foram positivos para DEK e 63,6% positivos para Phospho-P38. Houve uma correlação positiva para a imunoexpressão da proteína DEK e o estágio pTNM (P=0,011). A proteína fosfo-P38 não apresentou correlação com esses parâmetros. Pacientes com HScore negativo para DEK tiveram sobrevida média de 141,33 meses (IC95%: 112,41-170,25) e aqueles com HScore positivo tiveram sobrevida média de 25,10 meses (IC95%: 17,36-32,84) (P<0,001). Conclusão: Observou-se maior expressão de DEK em estágios avançados. Os pacientes que apresentaram expressão de DEK <4 tiveram maior sobrevida, sendo um fator de pior prognóstico.

The canonical wnt pathway in gastric carcinoma / Via canônica do wnt no carcinoma gástrico

ABSTRACT Background : It is believed that the Wnt pathway is one of the most important signaling involved in gastric carcinogenesis. Aim : To analyze the protein expression of canonical and non-canonical Wnt pathways in gastric carcinoma. Method : The immunohistochemistry was performed in 72 specimens of gastric carcinomas for evaluating the expression of Wnt-5a, FZD5, GSK3β, axin, CK1, ubiquitin, cyclin D1 and c-myc. Results : There were significant differences for cytoplasm and nucleus ubiquitin for moderately and well differentiated tumors (p=0.03) and for those of the intestinal type of the Lauren classification (p=0.03). The absence of c-myc was related to Lauren's intestinal tumors (p=0.03). Expression of CK1 in the cytoplasm was related to compromised margin (p=0.03). Expression of cyclin D1 protein was more intense in male patients (p=0.03) There was no relation of the positive or negative expression of the Wnt-5a, FZD5, GSK3 and Axin with any clinicopathological variables. Conclusion: The canonical WNT pathway is involved in gastric carcinoma.

RESUMO Racional : Acredita-se que a via Wnt é uma das mais importantes da sinalização envolvidas na carcinogênese gástrica. Objetivos : Analisar a expressão das proteínas das vias Wnt canônicas e não-canônicas no carcinoma gástrico e relacionar sua expressão com as variáveisclinicopatológicas. Método : Foram coletadas 72 amostras de carcinoma gástrico, e áreas representativas do tumor foram selecionadas para o Tissue Microarray. Imunoistoquímica foi realizada para avaliar a expressão de Wnt-5a, FZD5, GSK3β, axina, CK1, ubiquitina, ciclina D1 e c-myc. Resultados : Houve diferenças significativas para a expressão de ubiquitina no citoplasma e núcleo para tumores moderadamente e bem diferenciados (p=0,03) e para aqueles do tipo intestinal da classificação de Lauren (p=0,03). A expressão negativa da proteína c-myc no citoplasma foi relacionada aos tumores intestinais de Lauren (p=0,028). A expressão positiva de CK1 no citoplasma das células neoplásicas foi relacionada a tumores com margens cirúrgicas livre de envolvimento neoplásico (p=0,03). A expressão positiva da proteína ciclina D1 foi maior nos tumores dos homens (p=0,03). Não houve relação da expressão positiva ou negativa das proteínas Wnt-5a e FZD5 no citoplasma ou núcleo com quaisquer variáveis clinicopatológicas. O mesmo foi observado para GSK3β e Axin. Conclusões : A relação da expressão das proteínas da via canônica com as variáveis epidemiológicas e tumorais sugere sua participação na carcinogênese gástrica. Por outro lado, a ausência da relação das expressões das proteínas da via não-canônica sugere sua não participação na carcinogênese gástrica.

Expression of e-cadherin and wnt pathway proteins betacatenin, apc, tcf-4 and survivin in gastric adenocarcinoma: clinical and pathological implication / Expressão da e-caderina e das proteínas da via de sinalização wnt betacatenina, apc, tcf-4 e survivina no adenocarcinoma gástrico: implicações clínica e patológica

ABSTRACT Background: Gastric cancer is the fifth most frequent cancer and the third most common cause of cancer-related deaths worldwide.It has been reported that Wnt/ betacatenin pathway is activated in 30-50% of these tumors. However,the deregulation of this pathway has not been fully elucidated. Aim: To determine the expression of E-cadherin, betacatenin, APC, TCF-4 and survivin proteins in gastric adenocarcinoma tissues and correlate with clinical and pathological parameters. Method: Seventy-one patients with gastric adenocarcinoma undergoing gastrectomy were enrolled. The expression of E-cadherin, betacatenin, APC, TCF-4 and survivin proteins was detected by immunohistochemistryand related to the clinical and pathological parameters. Results: The expression rates of E-cadherin in the membrane was 3%; betacatenin in the cytoplasm and nucleus were 23,4% and 3,1% respectively; APC in the cytoplasm was 94,6%; TCF-4 in the nucleus was 19,4%; and survivin in the nucleus 93,9%. The expression rate of E-cadherin was correlated with older patients (p=0,007), while betacatenin with tumors <5 cm (p=0,041) and APC with proximal tumors (p=0,047). Moreover, the expression of TCF-4 was significantly higher in the diffuse type (p=0,017) and T4 tumors (p=0,002). Conclusion: The Wnt/betacatenin is not involved in gastric carcinogenesis. However, the high frequency of survivin allows to suggest that other signaling pathways must be involved in the transformation of gastric tissue.

RESUMO Racional: O câncer gástrico encontra-se entre as principais neoplasias malignas do mundo sendo o quinto mais incidente e o terceiro em relação ao índice de mortalidade. Acredita-se que a via Wnt/betacatenina esteja ativada em 30-50% desses tumores, porém a desregulação dela ainda não está completamente esclarecida. Objetivo: Avaliar a imunoexpressão das proteínas E-caderina, betacatenina, APC, TCF-4 e survivina em tecidos de adenocarcinoma gástrico e correlacioná-las com as variáveis clínicas dos doentes e anatomopatológicas do tumor. Método: Foram coletados os dados clínicos e anatomopatológicos dos prontuários de 71 doentes com adenocarcinoma gástrico submetidos à gastrectomia. O material obtido na operação foi submetido à análise imunoistoquímica e a frequência da expressão de cada proteína pôde ser analisada de acordo com a sua localização na célula e relacionada com as variáveis clinicopatológicas. Resultados: A graduação percentualda expressão e da localização das proteínas foi a seguinte: E-caderina em 3% na membrana; betacatenina em 23,4% no citoplasma e 3,1% no núcleo; APC em 94,6% no citoplasma; TCF-4 em19,4% no núcleo; e survivina em 93,9% no núcleo. Houve relação entre expressão da proteína E-caderina com a idade mais avançada (p=0,007); betacatenina com tumores <5 cm de diâmetro (p=0,041);APC com tumores proximais (p=0,047); e TCF-4 com tipo difuso da classificação de Lauren (p=0,017) e com o grau de penetração tumoral (p=0,002). Conclusão: A via Wnt/betacatenina não está envolvida na carcinogênese gástrica. Porém, a frequência elevada de survivina permite sugerir que outras vias sinalizadoras devam estar envolvidas na transformação do tecido gástrico.

The destruction complex of beta-catenin in colorectal carcinoma and colonic adenoma / O complexo destruidor de betacatenina no carcinoma colorretal e no adenoma cólico

ABSTRACT Objective To evaluate the destruction complex of beta-catenin by the expression of the proteins beta-catetenin, adenomatous polyposis coli, GSK3β, axin and ubiquitin in colorectal carcinoma and colonic adenoma. Methods Tissue samples from 64 patients with colorectal carcinoma and 53 patients with colonic adenoma were analyzed. Tissue microarray blocks and slides were prepared and subjected to immunohistochemistry with polyclonal antibodies in carcinoma, adjacent non-neoplastic mucosa, and adenoma tissues. The immunoreactivity was evaluated by the percentage of positive stained cells and by the intensity assessed through of the stained grade of proteins in the cytoplasm and nucleus of cells. In the statistical analysis, the Spearman correlation coefficient, Student’s t, χ2, Mann-Whitney, and McNemar tests, and univariate logistic regression analysis were used. Results In colorectal carcinoma, the expressions of beta-catenin and adenomatous polyposis coli proteins were significantly higher than in colonic adenomas (p<0.001 and p<0.0001, respectively). The immunoreactivity of GSK3β, axin 1 and ubiquitin proteins was significantly higher (p=0.03, p=0.039 and p=0.03, respectively) in colorectal carcinoma than in the colonic adenoma and adjacent non-neoplastic mucosa. The immunohistochemistry staining of these proteins did not show significant differences with the clinical and pathological characteristics of colorectal cancer and colonic adenoma. Conclusions These results suggest that, in adenomas, the lower expression of the beta-catenin, axin 1 and GSK3β proteins indicated that the destruction complex of beta-catenin was maintained, while in colorectal carcinoma, the increased expression of beta-catenin, GSK3β, axin 1, and ubiquitin proteins indicated that the destruction complex of beta-catenin was disrupted.

RESUMO Objetivo Avaliar o complexo de destruição da betacatenina no carcinoma colorretal e no adenoma do colo pela expressão das proteínas betacatenina, adenomatous polyposis coli, GSK3β, axina e ubiquitina. Métodos Amostras de tecidos de 64 doentes com carcinoma colorretal e de 53 pacientes com adenoma do colo foram analisadas. Blocos de tecidos foram submetidos ao estudo imuno-histoquímico com anticorpos policlonais nos tecidos do carcinoma, mucosa não neoplásica adjacente e adenoma. A imunorreatividade foi avaliada pela porcentagem de positividade de células coradas e pela intensidade do grau de coloração das proteínas no citoplasma e no núcleo das células. Na análise estatística, foram utilizados o coeficiente de correlação de Spearman, os testes t de Student, χ2, Mann-Whitney e de McNemar, e a análise de regressão logística univariada. Resultados No carcinoma colorretal, as expressões da betacatenina e da adenomatous polyposis coli foram significativamente maiores do que em adenomas do colo (p<0,001 e p<0,0001, respectivamente). A imunorreatividade das proteínas GSK3β, axina 1 e ubiquitina foi significativamente maior (p=0,03, p=0,039 e p=0,03, respectivamente) no carcinoma colorretal do que no adenoma e na mucosa não neoplásica adjacente. A coloração imuno-histoquímica dessas proteínas não apresentou diferenças significantes em relação às características clinicopatológicas do câncer colorretal e do adenoma. Conclusões Em adenomas, as menores expressões de betacatenina, axina 1 e GSK3β indicaram que o complexo de destruição da betacatenina estava conservado, enquanto que, no carcinoma colorretal, o aumento das expressões da betacatenina, GSK3β, 1 axina, e ubiquitina indicaram que o complexo de destruição de betacatenina estava alterado.

APC protein immunoexpression in colorectal adenoma and adenocarcinoma / Imunoexpressão da proteína APC nos tecidos de adenoma e de adenocarcinoma colorretais

BACKGROUND: activation of the Wnt pathway by mutated APC gene is considered the initial event in colorectal carcinogenesis. The identification of these mutations can improve the specific treatment of the adenocarcinoma. OBJECTIVE: detect and evaluate wild-type APC protein in tissue from colorectal adenoma, adenocarcinoma and adjacent mucosa. METHODS: 42 patients that underwent surgery for adenocarcinoma and 53 patients with resected adenomas were studied. Tissue samples from the adenocarcinoma were obtained from the tumor and from adjacent non-neoplastic mucosa located 10 cm from the proximal margin of the tumor. Adenoma tissue was obtained from representative areas. Blocks of tissue microarray (TMA) were submitted to immunohistochemistry with anti-APC, with readings of positivity and intensity of immunostaining and the score of immune expression of APC protein was obtained. RESULTS: the APC protein immune expression score showed a significantly lower expression of APC protein in the adenoma when compared with the adenocarcinoma (p < 0.0001) and adjacent mucosa (p < 0.0001). The APC protein immune expression score in the colorectal mucosa and adjacent to the adenocarcinoma showed no significant difference (p = 0.24). CONCLUSIONS: the finding of decreased expression of APC protein in adenoma tissue may indicate that the mutated APC gene may contribute to the changes in the adenoma-carcinoma process of carcinogenesis sequence. The strong expression of protein APC in tissues from the carcinoma and adjacent mucosa suggests that in most patients in this series, the mutation of the APC gene did not participate in the oncogenesis mechanism. (AU)

RACIONAL: a ativação da via Wnt pelo gene APC mutado é considerado evento inicial da carcinogênese colorretal. A identificação dessas mutações pode tornar o tratamento do adenocarcinoma mais específico. OBJETIVO: detectar e avaliar a proteína APC não mutada em tecidos de adenoma, adenocarcinoma e mucosa adjacente. MÉTODO: estudados 42 doentes operados de adenocarcinoma e 53 com adenomas ressecados. Tecidos de adenocarcinoma foram obtidas da neoplasia e da mucosa adjacente não neoplásica situadas a 10 cm da margem proximal do tumor. Tecidos do adenoma foram obtidas de área representativa. Blocos de tissue microarray (TMA) foram submetidos a imuno-histoquímica com anticorpo anti-APC. Avaliadas a positividade e intensidade da expressão e obtidos escores da imunoexpressão da proteína APC. RESULTADOS: o escore da imunoexpressão da proteína APC no adenoma foi significantemente menor do que no adenocarcinoma (p < 0,0001) e na mucosa adjacente (p < 0,0001). O escore da imunoexpressão da proteína APC na mucosa adjacente e no adenocarcinoma não mostraram diferença significante (p = 0,24). CONCLUSÕES: a menor expressão da proteína APC no adenoma pode indicar que o gene APC mutado participa das alterações do processo adenoma-carcinoma. A forte expressão da proteína APC no CCR e na mucosa adjacente sugerem que a mutação do gene APC não participou da oncogênese. (AU)

Correlation between immunoexpression of BCL-2 protein family with apoptosis index, cellular proliferation and survival in colorectal carcinomas

OBJECTIVES: To evaluate the Bcl-2, Bax, Bad and Bak immunoexpression in tumor and nontumorous tissue of 130 patients with colorectal carcinoma submitted to surgery at São Paulo Hospital, EPM/UNIFESP, from 2002 to 2005, and to correlate the immunoexpression data with the apoptotic index (AI, obtained by anti-cleaved caspase 3 and M30 labeling), cell proliferation score (CPS, obtained by Ki-67), immunoexpression of p53 and patient's clinical prognosis. RESULTS: Positive correlation was verified between Bcl-2 protein family in tumor and nontumor tissue. Only Bcl-2 protein correlated with IA and CPS in the tumor. Positive correlation was observed between pro-apoptotic proteins and Bcl-2 protein. In the adjacent mucosa, Bcl-2 correlated with Ki-67 and p53, but not with IA. Carcinomas exhibited higher immunoexpression of CPS and IA markers. No correlation occurred between immunoexpression data and patient survival. CONCLUSION: Positive correlation was observed between the pro-apoptotic proteins of the Bcl-2 family and the anti-apoptotic protein Bcl-2. In the adjacent nontumor mucosa, Bcl-2 correlated with Ki-67 and p53, but not with AI. Carcinomas presented greater immunoexpression for CPS and AI markers; however immunoexpression of these markers was not correlated with patient survival.

Canonical and noncanonical Wnt pathways: a comparison between endometrial cancer type I and atrophic endometrium in Brazil / Vias Wnt canônica e não canônica: uma comparação entre o câncer endometrial tipo I e endométrio atrófico no Brasil

CONTEXT AND OBJECTIVE: The Wnt pathway is involved in tumorigenesis of several tissues. For this reason, we proposed to evaluate Wnt gene expression in endometrial cancer type I. DESIGN AND SETTING: Cross-sectional study on materials gathered from the tissue bank of the Department of Pathology, Universidade Federal de São Paulo. METHODS: Endometrial specimens were obtained from surgeries performed between 1995 and 2005 at São Paulo Hospital, Universidade Federal de São Paulo. The material was divided into two groups according to tissue type: Group A, atrophic endometrium (n = 15); and Group B, endometrial adenocarcinoma (n = 45). We compared the immunohistochemical expression of Wnt1, Frizzled-1 (FZD1), Wnt5a, Frizzled-5 (FZD5) and beta-catenin between endometrial cancer type I and atrophic endometrium. RESULTS: Regarding Wnt1, FZD1 and Wnt5a expression, no significant association was observed between the groups. A significant association was observed between the groups in relation to FZD5 expression (P = 0.001). The proportion of FZD5-positive samples was significantly higher in group A (80.0 percent) than in group B (31.1 percent). Regarding the survival curve for FZD5 in group B, we did not find any significant association between atrophic endometrium and endometrial adenocarcinoma. We also did not find any significant association regarding beta-catenin expression (P = 1.000). CONCLUSION: FZD5 is downregulated in endometrial adenocarcinoma, in comparison with atrophic endometrium.

CONTEXTO E OBJETIVO: A via Wnt está envolvida na tumorigênese de diversos tipos de tecidos. Por essa razão, propusemo-nos a avaliar a expressão de genes da família Wnt no câncer endometrial tipo I. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo transversal com coleta de materiais do banco de tecidos do Departamento de Patologia da Universidade Federal de São Paulo. MÉTODOS: Amostras endometriais foram obtidas de cirurgias que ocorreram entre 1995 e 2005 no Hospital São Paulo, Universidade Federal de São Paulo. Foram separados dois grupos segundo o tipo de tecido obtido: grupo A, com endométrio atrófico (n = 15); e grupo B, com adenocarcinoma endometrial (n = 45). Comparamos a expressão imunoistoquímica de Wnt 1, Frizzled-1 (FZD1), Wnt 5a, Frizzled-5 (FZD 5) e beta-catenina entre câncer endometrial tipo I e endométrio atrófico. RESULTADOS: Na expressão do Wnt1, FZD1 e Wnt5a, não observamos associação significante entre os grupos. Na expressão do FZD5, encontramos associação significante entre os grupos (P = 0,001). A proporção de positividade do FZD5 foi significantemente maior no grupo A comparado ao grupo B (31,1 por cento). Em relação à curva de sobrevida para o FZD5 no grupo B, não tivemos associação significante entre endométrio atrófico e adenocarcinoma do endométrio. Também não observamos associação significante na expressão da beta-catenina (P = 1,000). CONCLUSÃO: FZD5 é downregulated no adenocarcinoma endometrial quando comparado ao endométrio atrófico.

Morfometria nuclear como técnica complementar na graduação citológica do carcinoma de mama / Nuclear morphometry with complementary technique in cytological grading of breast tumors cells

Introdução: A análise morfométrica dos parâmetros nucleares, tamanho, forma e aspectos da cromatina, mostra-se útil para diagnosticar tumores malignos. O aspirado citológico coletado por agulha fina produz esfregaços suficientemente delgados para a determinação de dimensões nucleares facilmente. Objetivo: Comparar os aspectos morfométricos dos núcleos das células do aspirado proveniente de nódulos de mama. Método: Esfregaços do aspirado provenientes de 71 biópsias de nódulos de mama e determinados como benignos ou malignos, coletados por agulha fina, foram submetidos à coloração de Feulgen e as suas imagens digitais analisadas utilizando-se a Imagilab® 2,3 (Softium Informatica Ltda.), ambientado no sistema operacional WindowsTM 98 SE. Resultados: Dentre os nódulos estudados, 20 foram diagnosticados como benignos e 51 como malignos (8 GI, 23 GII e 20 GIII de acordo com o Sistema de Classificação de Guilford e Robinson). A análise morfométrica da coloração de Feulgen determinou um valor médio para os nódulos benignos de 101,6 e valor médio de 114,3 para os nódulos malignos, respectivamente. A análise morfométrica da coloração de Papanicolaou determinou um valor médio de 103,5 para GI, 131,7 para GII e 98,4 para GIII, respectivamente. Houve uma diferença estatisticamente significante entre o valor médio morfométrico de nódulos benignos e malignos e valor médio entre GI e GII, GII e GIII, mas não entre GI e GIII. Conclusões: A análise morfométrica nuclear dos aspirados de nódulo de mama é um método simples, confiável e complementar, que permitiu distinguir as lesões benignas das lesões malignas da mama.

Introduction: The morphometrical analysis of nuclear parameters, such as size, shape and chromatin features, has shown to be useful for diagnosing malignant tumors. Cytological aspirate collected with fine needle, in turn, provides smears thin enough for easily determining nuclear dimensions. Objective: Compare morphometrical features of cell nuclei in aspirate from breast nodules. Method: Fine needle aspiration smears from 71 breast nodules were analyzed and determined as benign or malignant. They were then Feulgen-stained and had their digital images analyzed using the Imagilab® software package (Softium Informatica Ltda.) run on Windows? 98SE. Results: Among the nodules studied, 20 were diagnosed as benign and 51 as malignant (8 GI, 23 GII and 20 GIII according to Guilford and Robinson Classification System). The morphometrical analysis of the Feulgen-stained material digital images determined an average value for benign nodules of 101.6 and an average value of 114.3 for malignant nodules. The Papanicolaou stain morphometrical analysis determined an average value of 103.5 for GI, 131.7 for GII and 98.4 for GIII. There was a statistically significant difference between the morphometrical average values for benign and malignant nodules, and between GI and GII, and GII and GIII, but not GI and GIII average values. Conclusion: The nuclear morphometry of breast nodule aspirate is a simple, reliable and complementary method that allowed distinguishing benign from malignant injuries of the breast.

Estudo de p27, p21, p16 em epitélio escamoso normal, papiloma escamoso e carcinoma de células escamosas da cavidade oral / Comparative analysis of the immunohistochemistry expression of p27, p21WAF/Cip1, and p16INK4a in oral normal epithelium, squamous papilloma and squamous cell carcinoma

INTRODUÇÃO E OBJETIVO: O tipo de câncer oral mais frequente é o carcinoma de células escamosas, que corresponde a 95 por cento dos casos(9). O papiloma escamoso oral é uma neoplasia benigna normalmente associada à infecção pelo papilomavírus humano (HPV)(21). A análise da literatura mostra alterações nos genes reguladores do ciclo celular p27, p21WAF/Cip1 e p16INK4a, porém sem uma definição de seus papéis na carcinogênese oral. O objetivo foi caracterizar imuno-histoquimicamente p27, p21WAF/Cip1 e p16NK4a em epitélio escamoso normal, papilomas escamosos e carcinomas de células escamosas da cavidade oral. MÉTODOS: Imuno-histoquímica para p27, p21WAF/Cip1 e p16NK4a em 32 casos de epitélio escamoso normal, 30 casos de papiloma escamoso e 34 de carcinoma de células escamosas da cavidade oral. RESULTADOS: p27: 97,06 por cento dos casos de carcinoma de células escamosas apresentaram imunopositividade focal. O grupo papiloma escamoso apresentou 33,33 por cento e o grupo controle, 18,75 por cento. p21WAF/Cip1: 100 por cento de imunopositividade focal tanto no grupo controle como no grupo carcinoma de células escamosas, e 90 por cento no grupo papiloma escamoso. p16INK4a: 100 por cento de imunopositividade focal para os grupos controle e papiloma escamoso, e 94 por cento para o grupo carcinoma de células escamosas. CONCLUSÃO: Imuno-histoquimicamente demonstrou-se diferença significativa para p27 quando feita comparação dos grupos controle e papiloma escamoso com o grupo carcinoma de células escamosas. O p21WAF/Cip1 não demonstrou poder de diferenciar os grupos analisados. O p16INK4a apresentou imunopositividade difusa em uma minoria dos casos do grupo carcinoma de células escamosas. O grupo papiloma escamoso se comportou de maneira similar ao grupo controle em relação aos três marcadores.

INTRODUCTION: The most frequent type of oral cancer is the squamous cell carcinoma, which corresponds to 95 percent of the cases(9).The oral squamous papilloma is a benign neoplasia, commonly associated with infections caused by the human papilloma virus(21). The analysis of medical literature shows changes in cell cycle regulatory genes (p27, p21WAF/Cip1 and p16INK4a), but does not define their roles in oral carcinogenesis. Objective: Characterize the immuno-histochemical expression of p27, p21WAF/Cip1 and p16INK4a in oral normal squamous epithelium, oral squamous papilloma and oral squamous cell carcinoma. METHODS: Immuno-histochemical evaluation of p27, p21WAF/Cip1 and p16INK4a in 32 samples of oral normal squamous epithelium, 30 of oral squamous papilloma and 34 of oral squamous cell carcinoma. RESULTS: 97.06 percent of the oral squamous cell carcinoma group, 33.33 percent of the squamous papilloma group and 18.75 percent of the control group showed focal immunopositivity for p27. 100 percent of both control and oral squamous cell carcinoma groups and 90 percent of the oral squamous papilloma group showed focal immunopositivity for p21WAF/Cip1. 100 percent of both control and oral squamous papilloma groups and 94 percent of the oral squamous cell carcinoma group showed focal immunopositivity for p16INK4a. CONCLUSIONS: The study revealed a statistically significant difference for p27 expression when comparing the control and oral squamous papilloma groups with the oral squamous cell carcinoma group. p21WAF/Cip1 did not prove to be useful to differentiate the groups. p16INK4a showed diffuse immunopositivity in a minority of the oral squamous cell carcinoma cases. The oral squamous papilloma group behaved similarly to the control group as to the three markers.

Ki67 and p53 in gastrointestinal stromal tumors - GIST / Ki67 and p53 em tumores estromais gastrointestinais - GIST

CONTEXT: Gastrointestinal stromal tumor (GIST) is the most common mesenchymal tumor. Cellular proliferation and apoptosis is gaining importance for predicting prognosis in several cancers. OBJECTIVE: To investigate the Ki67 and p53 immunostaining in GISTs. METHODS: Specimens from 40 patients with GIST were assessed for immunohistochemical expression of Ki67 and p53. The tumors were divided according the risk of recurrence in two groups: I with high or intermediate risk and; II with low or very low risk. RESULTS: Among the 40 patients, 21 were men, the mean age was 56 years, 16 occurred in the small intestine and 13 in the stomach, 5 in the retroperitonium, 4 in the colon or rectum and 2 in the mesenterium. Thirty two tumors were from group I and 8 from group II. Half of the patients developed recurrence, being 90 percent of the group I (P = 0.114). The tumor Ki67 labelling index ranged from 0.02 to 0.35 (mean level 0.12). This index was marginally higher in the group I patients with recurrence (P = 0.09) compared to the patients of the same group without recurrence. p53 staining was expressed in 65 percent of the GISTs. A higher frequency of p53 and Ki67 had been found in the group I tumors when compared to the other group (P = 0.022; OR = 8.00 - IC 95 percent: 1.32-48.65). CONCLUSION: The most common site was the small intestine and 80 percent had a malignant potential justifying the high recurrence observed. No significant correlation was found between p53 and overall outcome of the patients. In group I patients, the evaluation Ki67LI may be a marker of prognosis. The positivity of both markers is higher among the patients with worst prognosis than in the others.

CONTEXTO: Os tumores estromais gastrointestinais (GIST) são os tumores mesenquimais mais frequentes. A proliferação intestinal e a apoptose são cada vez mais importantes na avaliação do prognóstico de diversos cânceres. OBJETIVO: Avaliar a imunoexpressão de Ki67 e p53 em GIST. MÉTODOS: Foram estudados a expressão de Ki67 e p53 por imunoistoquimica em tumores de 40 pacientes com GIST. Os tumores foram divididos segundo o risco de recurrência em 2 grupos: I com risco alto ou intermediário e II com risco baixo ou muito baixo. RESULTADOS: Entre os 40 pacientes, 21 eram do sexo masculino, a idade média foi de 56 anos, 16 ocorreram no intestino delgado, 13 no estômago, 5 no retroperitônio, 4 no cólon e reto, e 2 no mesentério. Trinta e dois tumores foram classificados no grupo I e 8 no grupo II. Metade dos pacientes desenvolveu recurrência, sendo 90 por cento de cólon (P = 0,114). O índice de proliferação tumoral Ki67 variou entre 0,02 e 0,35 (média = 0,12). Este índice foi marginalmente superior nos tumores do grupo I com recurrência (P = 0,09), quando comparado aos do mesmo grupo sem recurrência. A expressão do p53 foi observada em 65 por cento dos GISTs. Nos tumores do grupo I foi observada com maior frequência, expressão de p53 e Ki67 (P = 0,022; OR = 8.00 - IC 95 por cento: 1,32-48,65). CONCLUSÃO: A localização mais comum foi no intestino delgado, 80 por cento tinham potencial maligno, justificando a alta recurrência encontrada. Não se observou correlação significante entre p53 e evolução dos pacientes. Nos pacientes do grupo I, a avaliação do KI67LI pode ser um marcador de prognóstico. A positividade dos dois marcadores é maior entre os pacientes de pior prognóstico.

Evaluation of the immunoexpression of COX-1, COX-2 and p53 in Crohn's disease / Avaliação da imunoexpressão de COX-1, COX-2 e p53 na doença de Crohn

BACKGROUND: Crohn's disease accompanied by nonspecific or idiopathic ulcerative proctocolitis corresponds to a condition called intestinal inflammatory disease. The immunoexpression of cyclooxygenase 2 (COX-2) in Crohn's disease becomes more marked with progression of the disease and the presence of wild-type p53 suppresses the transcription of COX-2. AIMS: To investigate the immunoexpression of cyclooxygenase 1 (COX-1), COX-2 and p53 in Crohn's ileocolitis and to correlated this expression with clinical and histopathological parameters. METHODS: Forty-five cases of Crohn's disease, 16 cases of actinic colitis (diseased-control group) and 11 cases without a history of intestinal disease (normal control group) were studied. Hematoxylin-eosin-stained sections were submitted to histopathological analysis and the immunohistochemical expression of COX-1, COX-2 and p53 was evaluated by the streptavidin-biotin-peroxidase method. RESULTS: Sixty percent of the Crohn's disease patients were women and 40 percent were men, with 75.5 percent whites and 25.5 percent non-whites. The disease involved the terminal ileum in 44.5 percent of cases, ileum in 33.3 percent, colon in 20 percent and duodenum-ileum in 2.2 percent. A significant association was observed between COX-2 immunoreactivity and age <40 years. Histopathological analysis of Crohn's disease samples showed mild or moderate crypt distortion (57.8 percent and 35.6 percent of cases), atrophy (6.6 percent), mild, moderate and marked chronic inflammation (46.7 percent, 26.7 percent and 20 percent), acute inflammatory activity (93.3 percent), ulceration (24.4 percent), mucin depletion (37.8 percent), Paneth's cells (24.4 percent), intraepithelial lymphocytes (93.3 percent), and subepithelial collagen (6.7 percent). In the CD group, COX-1 immunoreactivity in epithelial and inflammatory cells was observed in 26.7 percent and 22.2 percent of cases, respectively. COX-2 immunoreactivity was detected...

RACIONAL: A doença de Crohn, junto com a colite ulcerativa idiopática ou inespecífica constituem a doença inflamatória intestinal. A imunoexpressão de ciclooxigenase 2 (COX-2) na doença de Crohn acentua-se com a progressão da doença, enquanto que a presença do tipo selvagem de p53 suprime a transcrição de COX-2. OBJETIVOS: Investigar a imunoexpressão de ciclooxigenase 1 (COX-1), COX-2 e p53 na doença de Crohn e correlacionar os achados com parâmetros clínico-histopatológicos. MÉTODOS: Foram estudados 45 casos de doença de Crohn (grupo teste), 16 casos de colite actínica (grupo controle-doente) e 11 casos sem história de doença intestinal (grupo controle normal). A avaliação histopatológica foi feita com lâminas coradas pela hematoxilina-eosina e a imunoexpressão de COX-1, COX-2 e p53 foi avaliada por imunoistoquímica, pelo método da estrepto-avidina-biotina-peroxidase. RESULTADOS: Entre os pacientes com doença de Crohn, 60 por cento eram do sexo feminino e 40 por cento do masculino, 75,5 por cento brancos e 25,5 por cento não-brancos. A doença comprometia o íleo terminal em 44,5 por cento dos casos, íleo em 33,3 por cento, cólon em 20 por cento e duodeno-íleo em 2,2 por cento. Associação significante foi detectada entre a imunoexpressão de COX-2 e pacientes com <40 anos. A histopatologia dos casos de doença de Crohn mostrou distorção críptica em grau leve ou moderado (57,8 por cento e 35,6 por cento dos casos), atrofia (6,6 por cento), inflamação focal, difusa superficial e difusa transmural (46,7 por cento, 26,7 por cento e 20 por cento), inflamação aguda neutrofílica (93,3 por cento), alterações epiteliais: ulceração (24,4 por cento), depleção de mucina (37,8 por cento), células de Paneth (24,4 por cento); alterações epiteliais associadas: linfócitos intra-epiteliais (93,3 por cento) e colágeno subepitelial (6,7 por cento). No grupo doença de Crohn, imunoexpressão de COX-1, em células epiteliais e inflamatórias foi observada em 26,7...

Perda de amostras em tissue microarray: comparação entre técnicas com uso de fita adesiva comercial, lâminas silanizadas pelo método tradicional ou por método modificado / Loss of tissue samples in the tissue microarray: comparison between techniques using commercial adhesive tape, silane-coated microslides by the conventional method and by a modified technique

Introdução/objetivo: O microarranjo tecidual, ou tissue microarray (TMA), permite avaliar múltiplas amostrasde tecido em um único bloco. Um dos problemas do TMA é o descolamento dos cortes teciduais, por isso, para reduzir essa perda, tem-se utilizado fita adesiva especial comercial. Não há relatos comparando o uso dessas fitas adesivas com a técnica de silanização modificada. O objetivo desse estudo foi comparar as perdas de cortes entre lâminas usando fitas adesivas comerciais, lâminas silanizadas por técnica convencional elâminas silanizadas por técnica modificada, com menor consumo de acetona. Material e método: O TMA foiconstruído com blocos de tecido hepático, em dispositivo de base fixa, colocando-se 32 cilindros de 2 mmde diâmetro em duplicata e espaçamento de 2,2 mm. Quinze secções de 4 μm foram colocadas em lâminas silanizadas a 4% por técnica convencional (grupo 1), 15 em lâminas silanizadas com técnica modificada (6%de silano e com uso mínimo de acetona) (grupo 2) e 15 em lâminas com fita adesiva comercial de acordo comas recomendações do fabricante (grupo 3). Todas as lâminas foram processadas por imuno-histoquímica para citoqueratina 18, com recuperação antigênica em tampão citrato pH 6, em microondas. As perdas de amostrasforam quantificadas e expressas como: perda total (≥ 80%), quase total (75% a 79%) ou parcial (50% a 74%).Resultados: A perda de tecidos foi semelhante nos três grupos: com silanização tradicional, modificada oufita adesiva comercial (4,9 vs. 3,1 vs. 8,1, respectivamente) (análise de variância [ANOVA], p = 0,3654). Umadas lâminas com a fita adesiva apresentou descolamento artefatual de todos os tecidos e outra de 20 tecidosem um dos lados. Nenhuma das lâminas silanizadas apresentou tal artefato. Conclusão: Lâminas silanizadas têm resultados satisfatórios, requerem menos treinamento técnico e reduzem os custos da utilização do TMA justificando seu uso em pesquisa...

Introduction/objective: The tissue microarray (TMA) technique allows the evaluation of multiple tissue samplesin a single block. One of the problems of TMA is the ungluing of tissue sections, thus commercial adhesive tape has been used to reduce this loss. There are no reports comparing the use of the commercial adhesive tape with the use of the modified silane-coated technique. The objective of this study was to compare section loss in slides using commercial adhesive tape, silane-coated microslides with the conventional technique or with the modified technique. Material and method: The TMA was constructed with hepatic tissue blocks embedded in paraffin, using a fixed base device, placing 32 cylinders of 2 mm in diameter in duplicate and 2.2 mm apart from each other. Fifteen 4-μm sections were placed on conventional silane-coated microslides at 4% (Group 1), 15 on silane-coated microslides with a modified technique (6% of silane and minimum use of acetone) (Group 2), and 15 on slides using commercial adhesive tape, according to the manufacturer's recommendations (Group 3). All microslides were processed by immunohistochemistry for cytokeratin 18, with antigen retrieval accomplished by incubation with citrate buffer pH 6.0 with microwave enhancement. Samples loss was quantified and expressed as: total (≥ 80%), almost complete (75% to 79%) or partial (50% to 74%). Results: The loss of sections was similar in all three groups (4.9 vs. 3.1 vs. 8.1, respectively) (analysis of variance [ANOVA], p = 0.3654). One slide usingcommercial adhesive tape showed artifactual ungluing of all sections and another one showed loss of 20 sampleson one side of the slide. None of the silane-coated microslides showed such artifact. Conclusions: Silane-coated microslides show adequate results, require less technical training and reduce the cost of TMA procedure, whatjustifies their use in research...

Variação de peso, grau de escolaridade, saneamento básico, etilismo, tabagismo e hábito alimentar pregresso em pacientes com cancêr de estômago / Weight, educational achievement, basic sanitation, alcoholism, smoking and eating habit in patients with gastric cancer

RACIONAL: Cerca de 35 por cento dos casos de câncer estão envolvidos com fatores advindos da dieta e de outros como o álcool, o fumo, a luz solar, agentes químicos e infecções por vírus. O câncer de estômago é o segundo tipo de câncer mais diagnosticado no mundo, sendo responsável por cerca de 9,9 por cento de todos os diagnósticos e cerca de 12,1 por cento das mortes. OBJETIVOS: Comparar o peso corpóreo atual e habitual, grau de escolaridade, saneamento básico, tabagismo, etilismo e freqüência pregressa de consumo de alimentos entre pacientes com câncer de estômago e população controle. MÉTODO: Setenta pacientes com câncer gástrico foram pareados a outros 70 indivíduos sem diagnóstico de neoplasia. Foram coletados peso, altura, informações sobre grau de escolaridade, saneamento básico, tabagismo e etilismo e preenchido um questionário de freqüência alimentar pregressa. RESULTADOS: Dos 75 pacientes elegíveis para o estudo, 42 eram homens, com média de idade de 59,5 anos. O grupo de pacientes com câncer apresentou menor peso e índice de massa corporal atual do que o grupo controle. Em relação ao grau de escolaridade, verificou-se que, no grupo de pacientes com câncer, 21 indivíduos nunca ingressaram na escola e dos que estudaram, cerca de 55 por cento não conseguiram concluir o primeiro grau. Nesse grupo, 32,9 por cento dos indivíduos tiveram acesso ao saneamento básico e 37,1 por cento à eletricidade no passado; no grupo controle, esse percentual foi de 68,6 por cento para cada uma das variáveis. No grupo caso, 58,6 por cento dos pacientes moraram na zona rural, enquanto no grupo controle apenas 7,1 por cento. No grupo caso, 65.7 por cento eram fumantes versus 44.3 por cento, no grupo controle. Observou-se também que os pacientes com câncer fumaram por período maior. O alcoolismo também foi mais freqüente entre os pacientes com câncer (45 por cento versus 19 por cento). Verificou-se que, entre os pacientes com câncer, houve maior consumo...

BACKGROUND: About 35 percent of the cancer patients are involved in factors coming from the diet and others like alcohol, smoking, sunlight, chemical agents and infections caused by virus. The stomach cancer is the second cause of cancer in the world with 9.9 percent of all diagnosis and about 12.1 percent of death cases. AIMS: Evaluate the body weight, educational achievement, basic sanitation, smoking, alcoholism and eating habit among patients with gastric cancer and a control group. METHODS: Seventy patients with gastric cancer were paired with 70 subjects without cancer. Data on the weight and height, educational attainment, basic sanitation, smoking, alcoholism and eating habits of the patients were collected from the clinical records and from interviews. RESULTS: Forty two patients were men, the mean age were 60 years old. The actual weight and body mass index of the patients were smaller when compared to the controls. Within the group of patients with gastric cancer, 21 never attended school, and for those who attended, 55 percent did not finish the elementary school. Among the patient group, 32.9 percent of them lived in housing with basic sanitation and 37.1 percent with electricity, against 68.6 percent of the controls, and 58.6 percent of the patients lived in rural area, against only 7.1 percent of the controls. Among the test group, 65.7 percent of the patients were smokers, whereas in the control group, 44.3 percent were smokers. In addition, there was also difference in the duration of smoking habit. Alcoholism was also more frequent in the cancer group (44 percent vs 19 percent). Food rich in salt, condiments, nitrates, saturated fat, complex carbohydrates, refined sugar and fried salted food had been more used by gastric cancer patients. CONCLUSION: The patients with gastric cancer presented with: less weight, low quality of life as indicated by lower or no access to basic sanitation, electricity and schooling, lived...

Effect of different periods of hyperbaric oxygen on ischemia-reperfusion injury of rat small bowel

PURPOSE: To determine whether hyperbaric oxygen (HBO) could effectively protect the small intestine mucosa against an ischemic insult, according to different periods of application. METHODS: The gut of 32 male rats was subjected to 60-min ischemia (clamping the mesenteric artery and vein); After they were further reperfused upon clamp opening during 60 min. Animal groups were as follows. GII = placed on HBO during the ischemia period; GIII = placed on HBO during reperfusion; GIV = treated with HBO throughout the ischemia-reperfusion period. Some animals (GI) did not receive HBO treatment at all and served as reference of ischemia-reperfusion injury (IR). HBO was carried out in a cylindrical acrylic chamber (2.0 ATA). Samples of small bowel were prepared for H.E staining for histological evaluations. RESULTS: The histological injury of mucosa was significantly less when HBO was administered during the ischemia period (17.6 ± 0.6) as compared with the IR (21.3 ± 1.8). HBO was not effective when applied during reperfusion (23.1 ± 2.1) or during the ischemia plus reperfusion period (18.7 ± 1.9). The thickness of the mucosa was preserved by HBO in ischemia (327.50 ± 30.23 µm) in comparison with the IR (172.79 ± 5.95 µm). In the periods of reperfusion (162.50 ± 6.05 µm) and ischemia plus reperfusion (296.49 ± 20.01 µm) the mucosa revealed a structural injury. CONCLUSION: Hyperbaric oxygen affects the ischemic insult of small bowel, being the favorable effect obtained when hyperbaric oxygen was administered early in the ischemic period.

OBJETIVO: Determinar se a oxigenação hiperbárica (OHB) protege a mucosa do intestino delgado de ratos após isquemia e reperfusão. MÉTODOS: 32 ratos machos foram submetidos a clampeamento da artéria e da veia mesentéricas superiores durante 60 minutos (isquemia) seguido de 60 minutos de reperfusão. Após estes procedimentos os animais fora separados em quatro grupos, a saber: grupo I (GI) isquemia e reperfusão (IR); grupo II (GII) submetido a OHB concomitante a isquemia, Grupo III (GIII) submetido a OHB durante a reperfusão e, grupo IV (GIV) submetido a OHB durante o período de isquemia e de reperfusão. A OHB foi realizada em câmara acrílica (2.0 ATA). Após anestesia, fragmentos do intestino delgado (íleo) foram fixados e processados para inclusão em parafina sendo os cortes corados pelo HE. As lâminas foram avaliadas quanto a presença de lesões histopatológicas da mucosa e avaliado a espessura da mucosa. RESULTADOS: A lesão histopatológica da mucosa foi significativamente inferior quando a OHB foi administrada na isquemia (12.6 ± 0.6) em comparação com o IR (21.3 ± 1.8). A OHB não foi efetiva quando aplicada durante a reperfusão (23.1 ± 2.1), ou durante a isquemia e reperfusão (18.7 ± 1.9). A espessura da mucosa foi preservada pela OHB na isquemia (327,50 ± 30.23 µm) em comparação com o IR (172.79 ± 5.95 µm). Nos períodos de reperfusão (162.50 ± 6.05 µm) e a isquemia (296.49 ± 20.01 µm) a mucosa apresentou lesão estrutural. CONCLUSÃO: A oxigenação hiperbárica protege a mucosa intestinal quando realizada durante o período de isquemia.

The effects of pentoxifylline into the kidneys of rats in a model of unilateral hindlimb ischemia/reperfusion injury

PURPOSE: To study the role of pentoxifylline (PTX) on remote kidney injury caused by muscle ischemia of left hindlimb of rats. METHODS: After xylazine and ketamine anesthesia, the left hindlimb of rats (n=66) were submitted to 6 hours ischemia (clamping the left common iliac artery). Three groups were used: sham group (SG, n=6), early group (EG, n=30) with reperfusion after 4 hours and late group (LG, n=30) with reperfusion after 24 hours. The saline solution (EG1, n=10 and LG1, n=10) or PTX (40mg.Kg-1) was administered in the reperfusion beginning (EG2, n=10/LG2, n=10) or divided in two doses in the ischemia beginning and reperfusion beginning (EG3, n=10/LG3, n=10). The plasmatic creatinokinase, urea, creatinine, sodium and potassium values were measure and histological samples from left kidney were prepared and H&E stained for scored cellular necrosis and degeneration of kidney tubules and thickness glomerulus determination. The apoptosis index was determined by immunohistochemical expression of the caspase-3. The tests of Mann-Whitney and Kruskal-Wallis (p < 0.05) were applied. RESULTS: The urea (90.5 ± 30.96 mg.dL-1), creatinine (2.28 ± 0.54 mg.dL-1), potassium (16 ± 3.66 mmol.dL-1) and mesangium thickness (0.97 ± 0.42 µm) values were significantly higher in group LG3. There was no significantly difference of caspase 3 expression between EG2 (16.35 ± 1.65 percent) and LG3 (15.57 ± 2.54 percent), and both were significantly worse than SG (9.8 ± 1.98 percent). CONCLUSIONS: The PTX has some protecting effect on remote kidney injury due to hindlimb ischemia/reperfusion injury only in the early phase of reperfusion.

OBJETIVO: Estudar o papel da pentoxifilina (PTX) nas lesões à distância no rim causadas pela isquemia no membro posterior esquerdo de ratos. MÉTODOS: Sob anestesia com xilazina e quetamina, o membro posterior de ratos (n=66) foi submetido a 6 horas de isquemia pelo clampeamento da artéria ilíaca comum esquerda. Foram estudados três grupos: grupo simulado (SG, n=6), grupo precoce (EG, n=30) após quatro horas de reperfusão e grupo tardio (LG, n=30) após 24 de reperfusão. A solução salina (EG1, n=10 e LG1, n=10) ou a PTX (40mg.Kg-1) foram administradas no início da reperfusão(EG2, n=10/LG2, n=10) ou divididas em duas aplicações no início da isquemia e no início da reperfusão (EG3, n=10/LG3, n=10). Foram medidos os valores plasmáticos da creatinofosfoquinase, uréia, creatinina, sódio e potássio. Amostras do rim esquerdo foram preparadas e coradas em HE para realizar o escore de necrose de células tubulares renais ou presença de obstrução tubular renal na área do córtex renal e da presença do espessamento do mesângio glomerular. O índice de apoptose foi determinado pela expressão imunoistoquímica da caspase-3. Foram aplicados os testes de Mann-Whitney e Kruskal-Wallis (p < 0.05). RESULTADOS: a dosagem de uréia (90,5 ± 30,96 mg.dL-1), creatinina (2,28 ± 0,54 mg.dL-1), potássio (16 ± 3,66 mmol.dL-1) e a espessura do mesângio(0,97 ± 0,42 µm) foram significantemente maiores nos animais do grupo LG3. Não houve diferença significante na expressão da caspase-3 entre os grupos EG2 (16,35 ± 1,65 por cento) e LG3 (15,57 ± 2,54 por cento) e ambos foram significantemente piores que o grupo SG (9,8 ± 1,98 por cento). CONCLUSÃO: A PTX oferece algum efeito protetor nas lesões à distância nos rins de animais submetidos à lesão de isquemia e reperfusão de membro posterior, no período de até quatro horas após a reperfusão.

Efficacy of estriol in inhibiting epithelial proliferation in mammary fibroadenoma: randomized clinical trial

CONTEXT AND OBJECTIVE: Mammary fibroadenoma is a disease that affects a large number of women of reproductive age. The aim of this study was to evaluate the proliferative activity of mammary fibroadenoma through expression of Ki-67 and c-myc antigens, following administration of oral contraceptive with or without estriol. DESIGN AND SETTING: Placebo-controlled double-blind randomized clinical trial in the Mastology Sector of the Department of Gynecology, Universidade Federal de São Paulo. METHODS: Thirty-three fibroadenoma patients were studied. Ten women (group 1) took an oral contraceptive constituted by levonorgestrel and ethinyl estradiol together with placebo manufactured in the same capsule for four consecutive cycles with a seven-day interval between them. The other 23 patients (group 2) took the same oral contraceptive together with estriol, which was put into the same capsule and used in the same way as among the group 1 patients. After four cycles, the nodules were surgically removed and sent for immunohistochemical analysis of Ki-67 and c-myc expression. RESULTS: The Ki-67 and c-myc analysis did not reveal any significant differences between the study groups. The values were 9.16 and 10.54 for group 1 and 10.86 and 17.03 for group 2, respectively. There was a tendency towards higher expression of antigens in group 2. CONCLUSION: Our results showed that there was no significant statistical difference in Ki-67 and c-myc expression between our study groups, but only a tendency towards higher expression among users of oral contraceptives containing estriol.

CONTEXTO E OBJETIVO: O fibroadenoma mamário é uma doença que atinge um grande número de mulheres na idade reprodutiva. O objetivo foi avaliar a atividade proliferativa do fibroadenoma mamário, através da expressão do Ki-67 e do c-myc, após a administração de anticoncepcional oral, associado ou não ao estriol. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Ensaio clínico randomizado, duplo-cego, placebo controlado, realizado na Universidade Federal de São Paulo a nível terciário. MÉTODOS: Foram estudadas 33 pacientes portadoras de fibroadenoma, atendidas no setor de Mastologia da Disciplina de Ginecologia da Universidade Federal de São Paulo - Escola Paulista de Medicina (Unifesp-EPM), sendo que 10 mulheres constituíram o grupo 1, e utilizaram anticoncepcional oral composto de levonorgestrel e etinilestradiol, associados a placebo na mesma cápsula por quatro ciclos consecutivos, com intervalo de sete dias entre cada um. As restantes 23 pacientes alocaram-se no grupo 2 e ingeriram, além do anticoncepcional oral descrito acima, um comprimido de estriol, que foi manufaturado na mesma cápsula e foi utilizado da mesma forma que nas pacientes do grupo 1. Ao final dos quatro ciclos, praticou-se a exérese cirúrgica dos nódulos, com posterior envio para análise imunoistoquímica de Ki-67 e c-myc. RESULTADOS: A análise com Ki-67 e c-myc não revelou diferença significante entre os grupos estudados, que foi de 9,16 e 10,54 no grupo 1 e de 10,86 e 17,03 no grupo 2, respectivamente, apesar de ter havido tendência a maior expressão dos marcadores entre as pacientes do grupo 2. CONCLUSÃO: Nossos resultados demonstram não haver diferença estatisticamente significante na expressão de Ki-67 e de c-myc entre os grupos em estudo, apenas uma tendência a sua maior expressão entre as usuárias de anticoncepcional e estriol.

Regiões organizadoras nucleolares argirofílicas no sarcoma sinovial / Argyrophilic nucleolar organizer regions in synovial sarcoma

Regiões organizadoras nucleolares (NORs) correspondem a alças do DNA contendo genes responsáveis pela transcrição do RNA ribossômico, de 18S e 28S, situados no nucléolo da célula. Por possuírem reatividade com a prata são chamadas de AgNORs. O presente estudo investigou a correlação entre o número de AgNORs por núcleo e o prognóstico em dez sarcomas sinoviais diagnosticados no Hospital A. C. Camargo, entre 1972 e 1986, com informações confiáveis de seguimento clínico. A análise dos resultados não revelou correlação entre as variáveis estudadas, mostrando que o número de casos investigados e sua homogeneidade morfológica não permitem conclusões acerca do valor prognóstico dos AgNORs nos sarcomas sinoviais. Outrossim, o método se revelou barato, rápido e de aplicação simples para todo e qualquer serviço de patologia cirúrgica, podendo ser útil para avaliação da proliferação celular na rotina de laboratórios de pequeno porte.

Cell proliferation and apoptosis in gastric cancer and intestinal metaplasia

RACIONAL: O aumento da proliferação celular é comumente observado no câncer e a apoptose pode ser medida útil na avaliação da cinética celular do tumor. Alterações do equilíbrio entre proliferação celular e apoptose estão associadas ao câncer. OBJETIVO: Avaliar a proliferação celular e a apoptose no câncer gástrico e na metaplasia intestinal. CASUÍSTICA E MÉTODOS: Vinte e dois tecidos de adenocarcinoma gástrico e 22 biopsias de metaplasia intestinal foram estudados. Os corpos apoptóticos foram estudados em lâminas coradas pela hematoxilina-eosina e a expressão de p53, bcl-2 e Ki67 por imunoistoquímica. RESULTADOS: O número de corpos apoptóticos foi maior no câncer. O Ki67LI aumentou no câncer gástrico em relação ao tecido com metaplasia intestinal. O p53 foi positivo em 68% dos pacientes com câncer, principalmente nos tumores avançados e negativo nos indivíduos com metaplasia intestinal. O bcl-2 foi expresso em 45% dos tecidos com câncer gástrico e em 68% dos tecidos com metaplasia, no entanto, esta diferença não foi significante. Nos doentes com câncer gástrico precoce, o bcl-2 foi expresso com maior freqüência quando comparados aos com câncer em estádio avançado. CONCLUSÃO: A expressão do bcl-2 foi maior no tecido com metaplasia, sugerindo envolvimento desta proteína na evolução da carcinogênese. O p53 foi negativo nos tecidos com metaplasia intestinal e positivo em 50% dos tecidos tumorais, principalmente nos doentes com câncer estádio IV, sugerindo ser um evento tardio no câncer gástrico.

Expressão da proteína tgfbeta1 em coração irradiado in vivo / In vivo evaluation of expression of TGFbeta1 in the irradiated heart

OBJETIVO: Avaliar, no coração, por imuno-histoquímica, a localização das proteínas TGFbeta1 latente e TGFbeta1 ativa, se ocorre ativação radioinduzida da proteína TGFbeta1 latente, e a distribuição das fibras colágenas em diversos períodos de tempo após irradiação. MATERIAIS E MÉTODOS: Trinta e dois camundongos isogênicos (C57BL) foram divididos em dois grupos: GI (não irradiado), com 12 animais, e GII (irradiado), com 20 animais. Os animais do GII receberam radiação gama (telecobaltoterapia, 60Co, com rendimento de 0,97 Gy/min., dose única de 7 Gy em corpo inteiro). Os camundongos dos grupos I e II foram sacrificados por estiramento cervical nos períodos de 1, 14, 30 e 90 dias após irradiação. RESULTADOS: Os corações irradiados apresentaram: 1) alterações nucleares e diminuição das estriações das células musculares cardíacas; 2) aumento significante da deposição de fibras colágenas aos 90 dias depois da irradiação; 3) ativação da proteína TGFbeta1 latente em cardiomiócitos e células do conjuntivo depois da irradiação. CONCLUSÃO: Nossos resultados mostram a importância da proteína TGFbeta1 no processo de fibrose cardíaca radioinduzida e sugerem que células do parênquima (cardiomiócitos) e do conjuntivo podem participar deste mecanismo atuando como fontes da proteína TGFbeta1 ativa.

OBJECTIVE: To assess the latent and active TGFb1 localization in the heart, to evaluate whether or not radiation induces latent TGFb1 activation, and to study the distribution of collagen fibers in the irradiated heart. MATERIALS AND METHODS: Thirty-two C57BL mice were randomly assigned in two groups: GI (non irradiated animals) and GII (irradiated animals). The mice from GII received a single whole-body radiation dose of 7Gy, using a 60Co source at a dose rate of 0.97 Gy/min. The animals were sacrificed by cervical dislocation at 1, 14, 30 and 90 days after irradiation. RESULTS: The irradiated hearts showed: 1) nuclear changes and muscle cells with decreased striations; 2) significant increase in the collagen deposition 90 days after irradiation; 3) latent TGFb1 activation in the cardiomyocytes and connective tissue cells after irradiation. CONCLUSION: Our results show the importance of TGFbeta1 protein in the process of radiation-induced heart fibrosis and suggest that cardiomyocytes and connective cells may play a role in this mechanism acting as cellular sources of active TGFbeta1

Apoptose: aspectos atuais e relevância para a radioterapia / Apoptosis: current aspects and relevance to radiotherapy

O objetivo do presente trabalho é realizar atualização a respeito da apoptose e sua importância para a radioterapia. A apoptose é um mecanismo de morte celular geneticamente programado, que ocorre espontaneamente e promove a remoção de células em tecidos normais. É essencial para o desenvolvimento normal e homeostase. Ocorre também naturalmente em certos tumores. Este mecanismo ativo de morte celular pode ser desencadeado pela radiação ionizante. Desta forma, no presente artigo são abordados os aspectos, morfológicos, ultra-estruturais, bioquímicos e moleculares envolvidos no processo e também a apoptose radioinduzida.